作为一个实验新手，很多时候提质粒提出来的浓度都有很大差异，有的高达500~600ng/uL，有的却只有几十。用的都是相同的菌株和试剂盒，为什么小提浓度会有这么大的差别呢？
要解决这个问题，我们得先来了解下质粒。‘
拷贝数
对于质粒载体，拷贝数是我们最关心的特性之一。实际上，每个细菌中的质粒的拷贝数主要决定于质粒本身的复制特性。按照复制性质，可以把质粒分为两类：
严紧型质粒：当细菌染色体复制一次时，质粒也复制一次，每个细菌内只含1～2个质粒；
松弛型质粒：当细菌染色体复制停止后仍然能继续复制，每一个细菌内一般含20个左右质粒拷贝。这些质粒的复制是在寄主的松弛控制之下的，每个细菌中含有10-200份拷贝，如果用一定的药物处理抑制寄主蛋白质的合成还可使质粒拷贝数增至几千份。
当然，恒定的拷贝数与质粒复制控制系统、质粒的大小及培养条件有关。
那么到这里你可能会问，高拷贝质粒我们可以多提一点质粒，低拷贝数的质粒有什么作用呢？确实，低拷贝数的质粒用途不是十分广阔，主要用于以下两点：
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高拷贝数的质粒往往不稳定，进行大片段克隆或者带有毒性DNA克隆时会用低拷贝；
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质粒的扩增会占用大量资源，当载体用于表达或者其他用途时，也会使用上低拷贝质粒。
质粒的接合转移与穿梭质粒
质粒的接合转移：是细菌遗传物质转移的一个重要方式。在质粒转移过程中，供体菌和受体菌通过结合作用紧密接触，质粒从供体细胞向受体转移，同时进行质粒复制。按能否自主转移，可以将天然存在的质粒分为转移型质粒和非转移型质粒两大类。
这里要注意的是，获得质粒的细菌可随之而获得一些生物学特性，如耐药性或产生细菌素的能力等。从环境友好出发，实验室里的废弃菌液，一定要灭过菌才能倒哦。
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