D-二聚体ELISA试剂盒解决方案

二聚体(D-Dimer)是一种纤维蛋白降解产物,是在血凝块被纤维蛋白溶解作用降解后存在于血液中的一个小蛋白质片段。之所以如此命名,是因为它是由纤维蛋白的两个D片段通过交联连接而成的蛋白。

当凝血级联蛋白被激活时,即通过与受损血管壁接触并暴露于组织空间中的胶原蛋白(内在途径),或通过组织激活因子激活因子VII(外在途径),即形成血凝块或血栓。两种途径均导致凝血酶的产生,凝血酶是一种将可溶性血蛋白纤维蛋白原转化为纤维蛋白的酶,该蛋白聚集成蛋白原纤维。凝血酶产生的另一种酶是因子XIII,然后在D片段位点交联纤维蛋白原,形成一种不溶性凝胶,作为血凝块形成的支架。

循环酶纤溶酶是纤维蛋白溶解的主要酶,可在许多地方裂解纤维蛋白凝胶。所得的片段“高分子量聚合物”被纤溶酶多次消化,形成中间产物,然后形成小聚合物(纤维蛋白降解产物或FDPs)。但是,两个D片段之间的交联仍保持完整,当纤维蛋白片段被充分消化时,它们会暴露在表面上。
图11

二聚体通常不存在于人血浆中,除非已激活凝血系统,例如由于血栓形成或弥散性血管内凝血。D-二聚体浓度可以通过血液检查确定,以帮助诊断血栓形成。自二十世纪九十年代问世以来,它已成为对可疑血栓形成疾病患者进行的一项重要测试。另外,它还用于诊断血液疾病弥散性血管内凝血。

D-二聚体的定量检测在其阴性结果中占有重要地位。D-二聚体检测阴性可用于排除肺栓塞、深静脉血栓形成、脑卒中和播散性血管内凝血等疾病。虽然D-二聚体水平升高可以提示这些疾病,但阳性结果并不是结论性的,需要进一步的医学调查——结果并不能说明D-二聚体水平高的位置或原因。此外,也很难对D-二聚体的 "正常 "水平进行分类,因此应用通常依赖于阴性测试。D-二聚体分析在整个凝血及其相关疾病(包括血栓形成)的研究中非常普遍。不断需要高准确度和灵敏度的检测方法来确定样品中的精确浓度。

艾美捷Abbexa D-二聚体ELISA试剂盒可有效地定量测量样品浓度——其灵敏度的提高使小样本也能得到分析。三级质控确保并维持高质量的生产过程。仅用于科研,不可用于临床诊断。
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小鼠D-二聚体ELISA试剂盒检测原理
图13

该试剂盒基于竞争性酶联免疫吸附测定技术。 将抗体预包被到96孔板上。 将标准品,测试样品和生物素偶联试剂添加到孔中并孵育。在预先包被的抗体上,生物素标记的D-二聚体与未标记的D-二聚体之间发生竞争性抑制反应。 然后加入结合了HRP的试剂,并孵育整个平板。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的物质。TMB底物用于定量HRP酶促反应。添加TMB底物后,只有含有足够D-二聚体的孔才会产生蓝色产物,然后在加入酸性终止溶液后变为黄色。黄色的强度与板上的D-二聚体含量成反比。在酶标仪中于450 nm处用分光光度法测量OD,由此可计算D-二聚体的浓度。
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OD值的标曲

D-二聚体ELISA试剂盒相关链接:
https://www.amyjet.com/featured/d-dimer.shtml

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