彗星实验检测试剂盒一站式解决方案

彗星实验又称单细胞凝胶电泳实验,是由Ostling等于1984年首次提出的一种通过检测DNA链损伤来判别遗传毒性的技术。

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彗星实验能有效地检测并定量分析细胞中DNA单,双链缺口损伤的程度。当各种内源性和外源性DNA损伤因子诱发细胞DNA链断裂时,其超螺旋结构受到破坏,在细胞裂解液作用下,细胞膜、核膜等膜结构受到破坏,细胞内的蛋白质、RNA以及其他成分均扩散到电解液中,而核DNA由于分子量太大不能进入凝胶而留在原位。

在中性条件下,DNA片段可进入凝胶发生迁移,而在碱性电解质的作用下,DNA发生解螺旋,损伤的DNA断链及片段被释放出来。由于这些DNA的分子量小且碱变性为单链,所以在电泳过程中带负电荷的DNA会离开核DNA 向正J迁移形成“彗星”状图像,而未受损伤的DNA部分保持球形。

DNA受损越严重,产生的断链和断片越多,长度也越大,在相同的电泳条件下迁移的DNA量就愈多,迁移的距离就愈长。通过测定DNA迁移部分的光密度或迁移长度就可以测定单个细胞DNA损伤程度,从而确定受试物的作用剂量与DNA损伤效应的关系。

该法检测低浓度遗传毒物具有高灵敏性,研究的细胞不需处于有丝分裂期。同时,这种技术只需要少量细胞。

那么,彗星分析实验(Comet assay)怎么做呢?

Comet Assay kit彗星分析试剂盒内提供了彗星分析所需的所有必需试剂,包括裂解液、彗星分析低熔点凝胶、DNA荧光染料、彗星分析玻片以及其它试剂。助您轻松完成彗星实验分析。

比如OxiSelect™ Comet Assay Kit

OxiSelect™ 3孔彗星分析试剂盒提供了一种快速,方便的方法来筛选一般的DNA损伤,无论损伤的来源或性质。试剂盒包括彗星玻片、试剂和荧光染料,用于在荧光显微镜下观察细胞。
在这里插入图片描述

用OxiSelect荧光显微镜观察DNA损伤™ 彗星分析试剂盒。

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依托泊苷对Jurkat细胞的治疗作用。未经依托泊苷处理的Jurkat细胞(左)和经依托泊苷处理的Jurkat细胞(右)™ 在33V/300ma碱性电泳条件下进行15分钟彗星试验。

配套的彗星实验结果分析软件

有如下3种主流的软件可用(均有文献)。可根据经验和需求进行选择。

1.OpenComet:免费;是Image J软件的一款彗星分析插件;

2.CaspLab (CASP):免费;独立软件;

3.Comet Assay IV:付费软件;可试用1周

那么今天的分享就到这里啦~~

彗星分析一站式解决方案-专业彗星分析试剂盒:

https://www.amyjet.com/featured/oxiselect-comet.shtml

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