现在的二代测序建库流程包括9步：RNA提取，反转录，打断，末端修复，加A，加接头，PCR，纯化，质控。
其中每一步都要消耗试剂和酶，建库的费用至少要100美元。
其实酶什么的都是用大肠杆菌表达生产的，成本只有售价的1/10 到1/100。如果规模大，成本还能降。
如果能用机器人在384 空板上做反应， 人工成本也能降下来。
一句话，如果规模足够大， 建库成本可以削很多。
我认为二代测序仪不适合做临床常规的转录组检测，基于以下三点考虑：
1，二代测序仪建库步骤多，成本高。
2，建库流程长，同时会导致质控的风险。我提到的9步，任何一步都有可能出错，从而影响最后的结果。
临床应用不同于科研。
极端的情况是：科研只要100次中成功了一次就算成功，而临床100次中只要一次出错了，就会有大问题。
3，二代测序建库时间太长，如果纯手动建库，Illumina需要2天左右的时间。
而第三代测序的RNA测序建库时间可以忽略，未来真的实现上午抽血，下午就出检测报告。