新订购的SY5Y与PC12与实验

寒假期间贮存细胞的液氮罐液氮挥发告罄,所有保存的种子全部over。损失惨重,这是一次血的教训,已排查出原因。因此,原计划的实验,日期被拖推迟。2.15返校至今,多在阅读文献,设计实验。2.23在国家细胞资源共享服务平台从北京分部订购了PC12、SY5Y两支细胞,分别于3.15和3.16收货。这是个惊喜,根据细胞中心的回复,应在下旬到货。将细胞中心的完全培养基吸出,留少许供细胞生长使用。前期扩增留种使用细胞中心的培养基,冻存一部分种子后,再换用自配培养基。
PC12细胞贴壁不牢固,在运输过程中导致许多细胞脱落成团。3.16,将上清液离心、吹打,将脱落细胞仍接种回培养培养瓶并换液。显微镜下观察发现,成团细胞经吹打后散开依附于瓶底,但不彻底。今日观察仍有部分细胞成团且漂浮,瓶底中部细胞密度偏大,达到90%左右。考虑明天上午1:3传代。
SY5Y贴壁生长,多个细胞核、呈多边形,线条多刚直,似撕碎的纸大片屑。这批SY5Y表现非常棒,今天换液后,增殖明显(40%增至65%)。考虑后天传代。
3.14晚上收到顺丰快递通知后,和本科毕设生做了部分准备工作:细胞室的卫生、照射紫外线、提前运行设备(二氧化碳培养箱、离心机、水浴锅等)使其稳定。3.15号将部分未使用玻璃培养瓶、胶头滴管、玻璃瓶、尖口玻璃离心管等高压灭菌并烘干。
3.16清洗一批使用过的玻璃器皿,超声机清洗、烘干、过夜泡酸、清洗、烘干、包装牛皮纸和塞棉花、高压灭菌。今天仍在高压灭菌,10点左右高压结束后过夜烘干,明天便可使用。
这批SY5Y约于月底可完成扩增留种,随后做些预实验大概需要一周的时间。目前在设计实验,希望在4.05号左右可以开始。

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