化学发光免疫分析有哪几种类型?

化学发光(ChemiLuminescence ,简称为CL)法是分子发光光谱分析法中的一类,它主要是依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,利用仪器对体系化学发光强度的检测,而确定待测物含量的一种痕量分析方法。化学发光与其它发光分析的本质区别是体系产生发光 (光辐射) 所吸收的能量来源不同。体系产生化学发光,必须具有一个产生可检信号的光辐射反应和一个可一次提供导致发光现象足够能量的单独反应步骤的化学反应。

化学发光免疫分析有以下四种类型:
(一)化学发光酶免疫测定
化学发光酶免疫测定(CLEIA)是采用化学发光剂作为酶反应底物的酶标记免疫测定。经过酶和发光两级放大,具有很高的灵敏度。以过氧化物酶为标记酶、以鲁米诺为发光底物、并加入发光增强剂以提高敏感度和发光稳定性。应用的标记酶也可以为碱性磷酸酶,发光底物为dioxetane磷酸酯,固相载体为磁性微粒。
(二)化学发光免疫测定
化学发光免疫测定(CLIA),是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的一类免疫测定方法。吖啶酯是较为理想的发光底物,在碱性环境中即可被过氧化氢氧化而发光。

(三)微粒子化学发光免疫分析

该免疫分析技术有两种方法:一是小分子抗原物质的测定采用竞争法;二是大分子的抗原物质测定采用双抗体夹心法。

(四)电化学发光免疫测定
电化学发光免疫测定(ECLI)是一种在电极表面由电化学引发的特异性发光反应,包括电化学和化学发光两个部分。分析中应用的标记物为电化学发光的底物三联吡啶钌或其衍生N-羟基琥珀酰胺(NHS)酯,可通过化学反应与抗体或不同化学结构抗原分子结合,制成标记的抗体或抗原。ECLI的测定模式与ELISA相似。其基本原理是发光底物二价的三联吡啶钉及反应参与物三丙胺在电极表面失去电子而被氧化。氧化的三丙胺失去一个H+而成为强还原剂,将氧化型的三价钌还原为激发态的二价钌,随即释放光子而恢复为基态的发光底物。这一过程在电极表面周而复始地进行,不断地发出光子而常保持底物浓度的恒定。

鲁米诺/3-氨基苯二甲酰肼/发光氨
异鲁米诺/4-氨基邻苯二甲酰肼
吖啶酯DMAE-NHS
吖啶酰肼NSP-SA-ADH
吖啶酯ME-DMAE-NHS
TOOS/N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐
MAOS/N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲基苯胺钠盐
ADOS/N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基l)-3-甲氧基苯胺钠盐
TOPS /N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐
ADPS/N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲氧基苯胺钠盐
ALPS/N-乙基-N-(3-磺丙基)苯胺钠盐
DAOS/N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐
HDAOS/N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐
MADB/N,N-二(4-磺丁基)-3,5-二甲基苯胺钠盐
三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐Tris-HCL
三(羟甲基)氨基甲烷Tris
N,N-二羟乙基甘氨酸BICINE
3-(环己胺)-1-丙磺酸CAPS
3-吗啉丙磺酸MOPS
N-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙磺酸TAPS
N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-3-丙磺酸 EPPS
3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸MOPSO
4-羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES
哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸)PIPES

以上内容来自小编zzj 2021.1.25

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