FITC荧光素标记多肽-靶向肽NYZL1方法结果(介绍标记多肽系列)

荧光标记技术是把荧光基团的共价键连接到蛋白、核酸等能够识别分子物质上的一种技术。这种技术通过了荧光的信号物质的特定基团,与识别分子物质的特定基团反应,从而完成其标记过程,利用标记物的荧光特性,来提供被检测对象的信号。
比如:
荧光标记靶向癌细胞的多肽RGD
荧光标记寡肽分子P-CY3
荧光标记小分子肽AEYLR
荧光标记低pH插入肽(pHLIP)
荧光标记ZP-16多肽荧光探针
荧光标记HS7肽
荧光标记肿瘤靶向KCT-W1多肽
荧光标记结肠癌肿瘤靶向多肽
荧光标记特异性结合短肽ZL4
荧光标记胃癌新生血管靶向性环肽GX1
荧光标记多肽An1
荧光标记γ3多肽片段
荧光标记FAPα作用底物肽段
荧光标记的NGR环肽
荧光标记的c(CNGRC)环肽
荧光标记穿膜小肽(PTS)
在这里插入图片描述

由于膀胱癌靶向肽NYZL1的特异性,为其临床应用提供理论基础,以下是FITC标记靶向肽NYZL1:

方法:
①采用固相化学合成法制备多肽及其异硫氰酸荧光素(FITC)连接肽,噻唑蓝(MTT)鉴定其细胞毒性。
②采用免疫荧光技术检测FITC-NYZL1与人膀胱癌组织结合的特异性,以FITC-svNYZL1作阴性对照。
③应用扫描激光共聚焦显微镜检测FITC-NYZL1与膀胱癌BIU-87,T24,E-J,5637细胞和肾癌KC细胞结合的特异性,以FITC-svNYZL1作阴性对照。

结果:
①成功制备了实验所需的化学合成肽,高效液相色谱纯化和质谱检测结果显示其纯度高达98%,MTT结果表明化学合成肽对BIU-87细胞的增殖无影响。
②FITC-NYZL1标记的膀胱癌组织出现了荧光富集,而其他组织未见荧光富集,FITC-svNYZL1标记的各组织均未见荧光富集。
③与对照组相比,FITC-NYZL1在膀胱癌细胞上均有荧光富集,且不同膀胱癌细胞间平均荧光强度差异无统计学意义(P>0.05)。

多肽NYZL1与膀胱癌组织,细胞均能特异结合,具有显著的结合特异性,为膀胱癌的早期诊断和靶向治疗提供了新的可能。

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